4-Nitrophenyl beta-D-galactopyranoside CAS: 200422-18-0

ຜົນ​ກະ​ທົບ​: ONPG ເປັນ substrate ນໍາ​ໃຊ້​ໂດຍ​ສະ​ເພາະ​ເພື່ອ​ກວດ​ສອບ​ການ​ມີ​ແລະ​ກິດ​ຈະ​ກໍາ​ຂອງ enzyme β-galactosidase​.ເມື່ອ enzyme β-galactosidase ມີຢູ່ແລະເຄື່ອນໄຫວ, ມັນແຍກ ONPG ເຂົ້າໄປໃນສອງຜະລິດຕະພັນ: o-nitrophenol ແລະອະນຸພັນ galactose.ການປົດປ່ອຍຂອງ o-nitrophenol ສົ່ງຜົນໃຫ້ມີການປ່ຽນແປງສີເຫຼືອງ, ເຊິ່ງສາມາດວັດແທກໄດ້ໂດຍໃຊ້ spectrophotometer.

ຄໍາຮ້ອງສະຫມັກ: ONPG ມີຫຼາຍຄໍາຮ້ອງສະຫມັກໃນຊີວະສາດໂມເລກຸນແລະການຄົ້ນຄວ້າຊີວະເຄມີ:

ການກໍານົດກິດຈະກໍາຂອງβ-galactosidase: ONPG ຖືກນໍາໃຊ້ໂດຍທົ່ວໄປເພື່ອວັດແທກແລະປະລິມານກິດຈະກໍາຂອງ enzyme β-galactosidase.ອັດຕາການສ້າງ o-nitrophenol, ເຊິ່ງເປັນອັດຕາສ່ວນໂດຍກົງກັບກິດຈະກໍາຂອງ enzyme, ສາມາດວັດແທກໄດ້ spectrophotometrically.

ການສະແດງອອກແລະລະບຽບການຂອງ gene: ONPG ມັກຈະຖືກນໍາໃຊ້ໃນການທົດລອງທີ່ກ່ຽວຂ້ອງກັບການສະແດງອອກຂອງ gene ແລະການສຶກສາກົດລະບຽບ.ມັນຖືກນໍາໃຊ້ເລື້ອຍໆໃນການວິເຄາະທາດໂປຼຕີນຈາກ fusion, ເຊັ່ນ: ລະບົບ lacZ fusion ທີ່ໃຊ້ທົ່ວໄປ, ເພື່ອສຶກສາການສະແດງອອກຂອງພັນທຸກໍາພາຍໃຕ້ການຄວບຄຸມຂອງຜູ້ສົ່ງເສີມສະເພາະ.ກິດຈະກໍາ beta-galactosidase ທີ່ວັດແທກໂດຍໃຊ້ ONPG ສະຫນອງຄວາມເຂົ້າໃຈກ່ຽວກັບລະດັບການສະແດງອອກຂອງ gene.

ການກວດຫາກິດຈະກໍາ β-galactosidase: ONPG ສາມາດຖືກນໍາໃຊ້ເປັນວິທີການກວດ colorimetric ໃນເຕັກໂນໂລຊີ DNA recombinant ເພື່ອກໍານົດການມີແລະການເຮັດວຽກຂອງ gene LacZ, ເຊິ່ງ encodes β-galactosidase.ວິທີການກວດນີ້ຊ່ວຍໃນການກໍານົດ clones ທີ່ມີ gene ມີຄວາມສົນໃຈ.

ການສຶກສາ kinetics Enzyme: ONPG ຍັງເປັນປະໂຫຍດໃນການສຶກສາ kinetics ຂອງ enzyme β-galactosidase.ໂດຍການວັດແທກອັດຕາການຕິກິຣິຍາຂອງ enzyme-substrate ໃນຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງ substrate ທີ່ແຕກຕ່າງກັນ, ມັນເປັນໄປໄດ້ທີ່ຈະກໍານົດຕົວກໍານົດການ kinetic ເຊັ່ນ: ຄົງທີ່ Michaelis-Menten (Km) ແລະອັດຕາການຕິກິຣິຍາສູງສຸດ (Vmax).