ວິທີການກໍານົດຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນທີ່ດີທີ່ສຸດ?
ສໍາລັບ inducer IPTG (isopropyl-beta-d-thiogalactoside), ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນສູງ, ດີກວ່າ.ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນທີ່ດີທີ່ສຸດແມ່ນຂຶ້ນກັບເງື່ອນໄຂການທົດລອງສະເພາະແລະຜົນກະທົບ induction ທີ່ຕ້ອງການ.
ໂດຍທົ່ວໄປແລ້ວ, ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງ IPTG ຖືກນໍາໃຊ້ໃນລະດັບ 0.1-1 mM.ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຕ່ໍາສາມາດຫຼຸດຜ່ອນຜົນກະທົບທາງລົບຕໍ່ການຂະຫຍາຍຕົວຂອງເຊນແລະສາມາດຫຼຸດຜ່ອນຄວາມເປັນພິດຂອງ cytotoxic ເນື່ອງຈາກການສະແດງອອກຂອງທາດໂປຼຕີນທີ່ເກີນເປົ້າຫມາຍ.ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນທີ່ສູງຂຶ້ນອາດຈະເຮັດໃຫ້ເກີດພາລະການເຜົາຜະຫລານຂອງເຊນຫຼາຍເກີນໄປ, ຜົນກະທົບຕໍ່ການເຕີບໂຕຂອງເຊນແລະປະສິດທິພາບການສະແດງອອກ.
ວິທີການກໍານົດຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນທີ່ດີທີ່ສຸດສາມາດເປັນການປະເມີນລະດັບການສະແດງອອກຂອງທາດໂປຼຕີນຈາກເປົ້າຫມາຍໂດຍການດໍາເນີນການທົດສອບ induction IPTG ໃນຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນທີ່ແຕກຕ່າງກັນ.ການທົດສອບວັດທະນະທໍາຂະຫນາດນ້ອຍສາມາດປະຕິບັດໄດ້ໂດຍໃຊ້ລະດັບຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງ IPTG (ຕົວຢ່າງ: 0.1 mM, 0.5 mM, 1 mM, ແລະອື່ນໆ) ແລະຜົນກະທົບການສະແດງອອກໃນຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນທີ່ແຕກຕ່າງກັນສາມາດຖືກປະເມີນໂດຍການກວດສອບລະດັບການສະແດງອອກຂອງທາດໂປຼຕີນຈາກເປົ້າຫມາຍ (ເຊັ່ນ: Western. ການກວດຫາ blot ຫຼື fluorescence).ອີງຕາມຜົນການທົດລອງ, ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນທີ່ມີຜົນກະທົບການສະແດງອອກທີ່ດີທີ່ສຸດໄດ້ຖືກເລືອກເປັນຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນທີ່ດີທີ່ສຸດ.
ນອກຈາກນັ້ນ, ທ່ານຍັງສາມາດອ້າງອີງເຖິງວັນນະຄະດີທີ່ກ່ຽວຂ້ອງຫຼືປະສົບການຂອງຫ້ອງທົດລອງອື່ນໆເພື່ອເຂົ້າໃຈລະດັບຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງ IPTG ທີ່ໃຊ້ທົ່ວໄປພາຍໃຕ້ເງື່ອນໄຂການທົດລອງທີ່ຄ້າຍຄືກັນ, ແລະຫຼັງຈາກນັ້ນເພີ່ມປະສິດທິພາບແລະປັບຕາມຄວາມຕ້ອງການໃນການທົດລອງ.
ມັນເປັນສິ່ງສໍາຄັນທີ່ຈະສັງເກດວ່າຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນທີ່ດີທີ່ສຸດອາດຈະແຕກຕ່າງກັນໄປຕາມລະບົບການສະແດງອອກທີ່ແຕກຕ່າງກັນ, ທາດໂປຼຕີນຈາກເປົ້າຫມາຍແລະເງື່ອນໄຂຂອງການທົດລອງ, ດັ່ງນັ້ນມັນຈຶ່ງດີທີ່ສຸດທີ່ຈະເພີ່ມປະສິດທິພາບໃນແຕ່ລະກໍລະນີ.
ເວລາປະກາດ: ກັນຍາ-28-2023